跑胶拖带的原因

跑胶拖带，这可真是个让人头疼的问题！为啥会拖带呢？其实原因有不少，咱一个个来说道说道。

非特异性扩增过多

PCR 产物出现拖尾，这可能是因为非特异性扩增太多了。比如说，模板不纯、Buffer 不合适、退火温度偏低、酶量过多、dNTP 和镁离子浓度偏高、循环次数过多或者模板量少、引物量过多，这些都可能导致拖尾。所以啊，要想解决这个问题，就得对症下药，把这些因素一个个排查掉。

样品浓度过高

提质粒的时候，要是出现拖带，可能是样品浓度过高了。这时候，简单的办法就是稀释一下样品，问题就能解决啦。

DNA 中掺杂蛋白质

提基因组 DNA 时，拖带的情况也不少见。这可能是因为提取的 DNA 中掺杂了蛋白质，这些蛋白质会拽着 DNA 一起跑，所以就出现了拖带。所以，在提取 DNA 时，一定要注意操作，减少蛋白质等杂质的出现。

样品破碎或被降解

要是样品破碎或者被降解了，也会导致拖带。所以，在跑胶之前，一定要确保样品的状态良好。

RNA 残留

还有一个可能，就是样品中残留了 RNA。RNA 会在 DNA 前面形成一片，经过纯化和 RNAse 处理，就能解决这个问题啦。

电泳体系问题

电泳体系也可能有问题哦！看看你的 marker 是否也有拖带现象，如果有，那就对照着来调整一下吧。比如说，电泳缓冲液 TAE 或 TBE 被污染了，就换个新的；上样时样品漂了，就增加上样缓冲液的用量，小心加样；电压太高了，就适当降低电压；凝胶浓度不合适，就根据核酸片断大小来调整一下。